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熒光顯微鏡的原理和結(jié)構(gòu)特點的介紹

作者:admin 瀏覽量:209 來源:本站 時間:2023-03-23 11:11:18

信息摘要:

熒光顯微鏡是利用一個高發(fā)光效率的點光源,經(jīng)過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光(如紫外光3650入或紫藍光4200入)作為激發(fā)光、激發(fā)標本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,再通過物鏡和目鏡的放大進行觀察。

熒光顯微鏡是利用一個高發(fā)光效率的點光源,經(jīng)過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光(如紫外光3650入或紫藍光4200入)作為激發(fā)光、激發(fā)標本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,再通過物鏡和目鏡的放大進行觀察。這樣在強烈的對襯背景下,即使熒光很微弱也易辨認,敏感性高,主要用于細胞結(jié)構(gòu)和功能以及化學成分等的研究。

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熒光顯微鏡的基本構(gòu)造是由普通光學顯微鏡加上一些附件(如熒光光源、激發(fā)濾片、雙色束分離器和阻斷濾片等)的基礎(chǔ)上組成的。熒光光源——般采用超高壓汞燈(50一200W),它可發(fā)出各種波長的光,但每種熒光物質(zhì)都有一個產(chǎn)生很強熒光的激發(fā)光波長,所以需加用激發(fā)濾片(一般有紫外、紫色、藍色和綠色激發(fā)濾片),僅使一定波長的激發(fā)光透過照射到標本上,而將其他光都吸收掉。每種物質(zhì)被激發(fā)光照射后,在很短時間內(nèi)發(fā)射出較照射波長更長的可見熒光。熒光具有專一性,一般都比激發(fā)光弱,為能觀察到專一的熒光,在物鏡后面需加阻斷(或壓制)濾光片。

它的作用有二:一是吸收和阻擋激發(fā)光進入目鏡、以免于擾熒光和損傷眼睛,二是選擇并讓特異的熒光透過,表現(xiàn)出專一的熒光色彩。兩種濾光片要選擇配合使用。


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